| dc.description.abstract | O câncer é a segunda causa mais comum de morte no Brasil. Novas terapêuticas baseadas na utilização de produtos naturais ricos em lactonas sesquiterpênicas, como aquelas presentes na Tithonia diversifolia têm ganhado cada vez mais espaço devido as suas atividades citotóxicas e antiproliferativas contra células tumorais. Além disso, nos últimos anos, técnicas extrativas em alta pressão que fazem uso de gases em estado supercrítico como solventes extratores têm sido utilizadas por representarem tecnologias “verdes” altamente eficientes de extração. Assim, este trabalho tem como objetivo investigar os efeitos citotóxicos e antitumorais do extrato bruto obtido por fluido supercrítico das folhas Tithonia diversifolia (EScTD). O processo de extração por meio do método de fluido supercrítico, utilizando-se o CO2 como solvente extrator (2 ml/min), a 40 ºC e 200 bar, durante 180 min. A análise cromatográfica foi realizada por meio de cromatografia liquida de alta eficiência. Os solventes utilizados na fase móvel foram: (B) acetonitrila e (A) ácido acético à 1% em água milli-q (20 μL, a 1 mL/min, por 10 min), e os cromatogramas foram analisados no comprimento de onda de 254 nm. Para triagem de atividade citotóxica contra células tumorais 50 μg/mL do EScTD foram testados contra as linhagens A549 (adenocarcinoma alveolar de células basais de pulmão humano), PC3 (Carcinoma de próstata), HCT-116 (cólon - humano), HL60 (Leucêmica) e SNB19 (Glioblastoma) foram cedidas pelo Instituto Nacional do Câncer (EUA), cultivadas em meio RPMI 1640. Posteriormente, a linhagem mais sensível (A549) foi selecionada para teste de citotoxicidade com baixas concentrações de EScTD (2, 4, 6, 8 e 10 μg/mL), assim como a linhagem L929 (fibroblasto não maligno murino), e calculado o IC50. No ensaio in vivo de atividade antitumoral, 24 camundongos Swiss foram inoculados com células de Sarcoma 180 e divididos em 4 grupos (n=6): tratado com salina (CTR), tratado com 5 Fluorouracil (5-FU), e tratados com 10 mg/Kg e 30 mg/Kg do extrato (EscTD) durante 7 dias. Posteriormente, os tumores foram removidos, assim como fígado, baço e rins, pesados e analisados microscopicamente. Foram avaliados, ainda, a massa ponderal dos animais, e parâmetros hematológicos e bioquímicos. Os dados foram submetidos a tratamento estatístico, considerando significativas diferenças onde p<0,05. O rendimento do extrato foi 1,02 ± 0,2% e o perfil cromatográfico exibiu um pico eluído em aproximadamente 5 min, compatível com tagitinina C. No teste de triagem citotóxica, o EScTD apresentou elevados percentuais citotóxico (>75% inibição) frente a todas as linhagens testadas com enfase para A549, PC3 e HCT-116 (100%). No teste de citotoxicidade com baixas concentrações de EScTD a IC50 foi de 2,2 μg/mL para as células A549 e de 8,0 μg/mL para L929. Foi observada redução significativa de massa ponderal dos tumores nos grupos tratados com 5-FU, EScTD 10 e 30mg/Kg em comparação com o grupo CTR (p<0,05). Contudo, apenas os grupos tratados com EScTD a 30 mg/Kg e 5-FU, mas não o EScTD a 10 mg/Kg, exibiram perda significativa de massa corpórea (p<0,05 e p<0,001, respectivamente), além de sinais hematológicos e bioquímicos de imuno, hepato e citotoxicidade. Conclui-se que estes resultados sugerem que o EScTD apresenta elevada atividade citotóxica contra células tumorais malignas, e ação antitumoral em modelo experimental murino de sarcoma 180. Além disso, a dose de 10 mg/kg do extrato promoveu menor toxicidade, o que parece promissor para estudos futuros em terapias anticâncer. | pt_BR |
