DESENVOLVIMENTO, CARACTERIZAÇÃO E AVALIAÇÃO DO POTENCIAL CICATRIZANTE DE MEMBRANAS DE GELATINA CONTENDO EXTRATO AQUOSO DE Punica granatum Linn
Abstract
Punica granatum é uma espécie vegetal amplamente utilizada como fitoterápico no tratamento de lesões da pele. A incorporação de extratos vegetais com atividade biológica antioxidante em coberturas de feridas tem sido utilizada para melhorar o processo cicatricial. Portanto, os objetivos deste trabalho foram desenvolver membranas poliméricas de gelatina contendo extrato de Punica granatum Linn, caracterizar suas propriedades morfofuncionais e avaliar o efeito dessas membranas sobre a cicatrização de feridas dérmicas abertas em modelo murino experimental. Extrato aquoso, metanólico e hidrometanólico foram obtidos por maceração dinâmica, e caracterizados quanto ao rendimento, e seus compostos tânicos majoritários foram identificados por cromatografia líquida de alta eficiência com espectrometria de massa (CLAE-EM). Foram produzidas por casting, membranas de gelatina (GEL) pura e contendo extrato aquoso de Punica granatum (GELPG), e caracterizadas quanto às propriedades físico-químicas (apresentação macroscópica, tensão/deformação, permeabilidade ao vapor d‘água, intumescimento, análise de microsestruturas em microscopia eletrônica de varredura e espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier). Para o ensaio biológico de cicatrização, feridas foram induzidas na pele do dorso de ratos Wistar (n=60) distribuídos em três grupos (n=20): wGEL, cobertas com membranas de gelatina; wGELPG, cobertas com membranas de gelatina contendo extrato aquoso de Punica granatum a 1% e CTR, feridas sem coberturas. Cinco animais de cada grupo foram eutanasiados após 3, 7, 14 e 21 dias. As feridas foram analisadas macroscopicamente quanto ao índice de retração percentual das feridas (IRF) e histologicamente quanto à resposta inflamatória, reação de granulação e colagenização. O rendimento do EAPG foi de 58,34 ± 1,71 e sua atividade antioxidante foi considerada alta (IC50=1,715 ± 0,24 μg/mL). O ácido gálico, punicalagina α, punicalagina β e ácido elágico foram os compostos majoritários dos extratos. As membranas GELPG se mostraram levemente amareladas, mas contínuas e homogêneas, além de mais espessas (p<0,001), mas não houve alteração nas suas propriedades mecânicas quando comparadas a GEL. Além disso, GELPG se mostrou menos permeável ao vapor d‘água e apresentou maiores índices de intumescimento (p<0,05). A análise em FTIR sugeriu a incorporação do EAPG nas membranas. As feridas cobertas com GELPG apresentaram IRFs significativamente maiores em 3 (p<0,01), 7 (p<0,001) e 14 dias (p<0,001), melhor reação de granulação, deposição e arranjo arquitetural das fibras de colágeno cicatriciais quando comparado a GEL. Concluiu-se que, neste estudo, o uso de membranas de gelatina contendo extrato aquoso da casca do fruto da Punica granatum promoveu melhorias substanciais do processo de cicatrização de feridas abertas em modelo murino, expressas por meio da aceleração da contração da ferida, modulação da magnitude da resposta inflamatória e aprimorando a colagenização durante a formação da cicatriz fibrosa.