Imobilização de lipase de Burkholderia cepacia em biochar derivado de semente de goiaba – Psidium guajava L
Abstract
O agronegócio é hoje a principal força motriz na economia de diferentes países e envolve
atividades voltadas para produção, processamento, armazenamento, distribuição dos produtos
agrícolas e pôr fim a constante avaliação do potencial de geração de energia renovável a partir
de resíduos agroindustriais. A imobilização de lipases utilizando suportes oriundos de
resíduos agroindustriais é uma das alternativas na agroindústria moderna a fim de atender aos
conceitos de desenvolvimento sustentável e medidas para reverter à situação do meio
ambiente. Na cadeia produtiva da produção de sucos e doces de goiaba, uma das principais
atividades de agronegócio do estado de Sergipe, a semente gerada foi utilizada para a
produção de bio-óleo a partir da pirólise e o resíduo sólido oriundo deste processo é
denominado biochar. A fim de se ter novas alternativas para o desenvolvimento sustentável o
objetivo deste trabalho foi avaliar o uso do biochar como suporte para a imobilização da
lipase de Burkholderia cepacia (BC) por adsorção física (ADS) e ligação covalente (LC). Nas
propriedades bioquímicas dos biocatalisadores imobilizados observou-se o pH ótimo 4,0 para
a lipase de BC imobilizada por adsorção física e pH 7,0 para a enzima livre e para o
biocatalisador imobilizado por ligação covalente. A temperatura ótima para os
biocatalisadores imobilizados foi 60 °C, 10 °C acima da temperatura ótima da enzima livre.
Os parâmetros cinéticos determinados para a enzima livre e os biocatalisadores imobilizados
por ADS ou LC para a Vmax foram 3333, 2000 e 2500 μmol/ g.min, respectivamente. E o
valor de Km para lipase livre foi 665 mM e para os biocatalisadores imobilizados ADS e LC
os valores de Km foram de 219 e 369 mM, respectivamente. A lipase de BC imobilizada por
ADS apresentou melhor estabilidade operacional quando comparada com lipase de BC
imobilizada por ligação covalente, o reuso máximo foi de 17 vezes considerando a
manutenção de 50 % da sua atividade inicial (2000 U/g). Observou-se a partir das análises de
MEV do biocatalisador imobilizado que ocorreu a formação de multicamadas na imobilização
por ligação covalente corroborando assim para a baixa estabilidade operacional devido a
lixiviação destas camadas durante o reuso. A partir dos espectros obtidos na análise de
infravermelho por transformada de fouier pode-se confirmar as bandas características do
grupamento amida (N-H) indicando assim a imobilização da lipase de BC no biochar
imobilizados por ADS e LC.