Caracterização bioquímica da lipase de uma nova fonte de bacillus sp. imobilizada em poli(3- hidroxibutirato-co-hidroxivalerato)

Abstract

As poucas abordagens existentes para a imobilização de lipases de Bacillus e Geobacillus em suportes, evidenciam o enorme potencial inexplorado desse grupo de biocatalisadores. Nesse sentido, o objetivo do presente trabalho foi realizar a imobilização da lipase pelo método de adsorção física de uma nova fonte de Bacillus sp. (ITP-001) no biopolímero poli (3-hidroxibutirato-cohidroxivalerato) (PHBV) e a avaliação das propriedades bioquímicas.A atividade hidrolítica da lipase imobilizada foi determinada pelo método de hidrólise do azeite de oliva de acordo com o procedimento descrito por Soares et al., 1999, com algumas modificações. . A eficiência de imobilização foi de 25% para uma razão mássica enzima/substrato de 0,3g/g. O pH ótimo da lipase imobilizada foi 4,0 e a temperatura ótima foi 37°C. A taxa constante de inativação e o tempo de meia-vida para a enzima imobilizada foram determinadas a 37°C e 60°C, os valores calculados foram de kd = 0,0038 h-1 e t1/2 = 182,41 h; kd = 0,0066 h-1 e t1/2 = 105,02 h, respectivamente para as temperaturas. Os parâmetros cinéticos obtidos foram Km igual à 49,10 mM e Vmax igual á 205,03 U/g. A estabilidade operacional da enzima imobilizada foi testada em 14 ciclos de reutilização com manutenção de mais de 50% de sua atividade inicial após 8 reusos.