PRODUÇÃO E PURIFICAÇÃO DA LACASE DE Pleurotus sajor-caju USANDO VINHAÇA DA CANA-DE-AÇÚCAR PROVENIENTE DA INDÚSTRIA SUCROENERGÉTICA
Abstract
A lacase (EC 1.10.3.2), excretada pelo fungo Pleurotus sajor-caju (CCB 020), foi produzida em fermentação submersa utilizando como substrato vinhaça de cana-de-açúcar proveniente da indústria sucroenergética. É importante reaproveitar o potencial deste subproduto poluidor para a síntese de enzimas de interesse biotecnológico durante seu processo de degradação. Para maior síntese da lacase o uso de indutores é fundamental, visando, consequentemente, redução do custo final da enzima. A enzima foi purificada utilizando sistema aquoso bifásico (SAB). O melhor indutor utilizado foi o CuSO4 (sulfato de cobre), que na concentração de 0,4 mM aumentou a produção de lacase em 4 vezes, obtendo atividade enzimática de 539,3 U/L. A indução por etanol também ocorreu, atingindo atividade enzimática de 364,5 U/L ao utilizar a concentração de 2% de etanol, tendo um aumento de 2,8 vezes se comparado a amostra controle. Ao final da fermentação, foi produzido 10,08 g/L de biomassa fúngica com consequente descoloração da vinhaça de 92%, e remoção da turbidez de 99,2%. Durante o processo de purificação enzimática, a lacase tendeu a migrar para fase de topo do sistema, rica em polímero, e o maior fator de purificação obtido foi de 2,88, encontrado em sistemas compostos por 12% (m/m) de PEG 1500 e 20% (m/m) de tampão citrato (pH 6,0). Assim, esse estudo mostrou que o uso de indutores pode aumentar a síntese de lacase por P. sajor-caju usando vinhaça como substrato, além de, durante o processo fermentativo, reduzir cor e turbidez deste resíduo poluidor.