DESENVOLVIMENTO DE UM CRIOPROTETOR CONTENDO GOMA ÁGAR PARA A CONSERVAÇÃO DE SÊMEN HUMANO
Abstract
A infertilidade masculina está diretamente relacionada com a qualidade espermática e a dificuldade de tratamento ligado a infertilidade conjugal tem incentivado a procura e as pesquisas sobre a técnica de criopreservação seminal. Para preservar a funcionalidade espermática os espermatozoides são criopreservados em baixas temperaturas, entretanto, este processo pode ocasionar injúrias na célula. Na tentativa de minimizar esses danos, diversos crioprotetores têm sido desenvolvidos. Este trabalho tem como objetivo avaliar o efeito da adição da goma ágar (GA) na solução crioprotetoras, sobre a conservação de sêmen humano. Este estudo foi realizado em clínica especializada em reprodução humana assistida, em conjunto com a Universidade Tiradentes – UNIT (Aracaju/SE – Brasil). Os pacientes que preencheram os critérios de inclusão, voluntariamente, assinaram um Termo de Consentimento Livre e Esclarecido (TCLE) e foram convidados a participar da pesquisa, mediante esclarecimento dos termos e concordando com os procedimentos a serem realizados. Foram selecionadas 33 amostras seminais normais, coletadas e analisadas no período de Julho a Outubro de 2015. A análise seminal de rotina (tempo de liquefação, aferição do volume e do pH, viscosidade, motilidade, vitalidade e morfologia) foi realizada nas amostras a fresco e criopreservadas. Nas amostras criopreservadas também foi avaliada a integridade espermática (avaliação da integridade da membrana plasmática e acrossomal e da atividade mitocondrial) a partir do uso de sondas fluorescentes. As amostras foram divididas em seis grupos: (i) GEYC + GA 0,05%; (ii) GEYC + GA 0,10%; (iii) GEYC + GA 0,15%; (iv) GEYC + GA 0,2%; (v) TYB e (vi) GEYC. A adição dos meios crioprotetores às amostras seminais foi realizada de acordo com protocolos previamente estabelecidos pela Organização Mundial da Saúde. Para dados estatísticos foram utilizados os testes de Shapiro-Wilk, ANOVA e Tukey com um nível de significância de 5%. Nos parâmetros de motilidade total e progressiva e percentual de espermatozóides viáveis, todos os grupos criopreservados contendo GA apresentaram resultados similares aos grupos controle v e vi (p>0,05). Nesses mesmos parâmetros as amostras a fresco apresentaram resultados significativamente superiores (p<0,05) quando comparadas aos demais grupos. Na análise morfológica somente o grupo contendo GA 0,05% apresentou resultados semelhantes (p>0,05) ao grupo a fresco. Em relação a integridade espermática todos os grupos criopreservados contendo GA apresentaram resultados semelhantes aos grupos controles v e vi (p>0,05). Desta forma, a GA na concentração de 0,05% apresenta-se como uma substância com potencial crioprotetor para espermatozoides humanos, pois foi capaz de manter a morfologia espermática normal após a criopreservação. O grupo contendo GA 0,05% apresentou-se como um potencial crioprotetor para espermatozóides humanos.